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　　ibidi 聚合物蓋玻片和玻璃蓋玻片的楊氏模量分別約為 1 GPa 和 70 GPa。

　　

　　注：楊氏模量（或彈性模量）描述了固體材料的拉伸彈性。 它本質(zhì)上是材料的剛度，或者換句話說，材料彎曲或拉伸的難易程度。

　　

　　2、是否可將ibidi Culture-Inserts/ibidi插件放置在預(yù)涂層的表面上？

 

　　

　　一般來說，只要涂層干燥，ibidi Culture-Inserts/ibidi插件是可以放置在涂層表面上的。 請注意，插件不會粘在潮濕的表面上。

　　

　　有關(guān)更多信息，請關(guān)注我們公眾號，參閱為什么當(dāng)移除 ibidi Culture-Insert/ibidi插件時細胞有時會從蓋玻片上脫落？(將在后續(xù)公眾號中推出)

　　

　　3、ibidi 聚合物蓋玻片通常會發(fā)生什么水平的氣體交換/滲透性？ 它們真的允許氣體交換嗎？

　　

　　ibidi 聚合物蓋玻片確實允許氣體交換。 在 23°C 時，O2 的滲透性為 153 cm³/ (m² d bar)，CO2 的滲透性為 474 cm³/ (m² d bar)。 這意味著在 1 bar 大氣壓下，每天 153 cm3 O2 可以穿透 1 m2 的 180 µm (+10/-5 µm) 厚聚合物薄膜。

　　

　　對于 ibidi Stage Top 孵化系統(tǒng)的缺氧實驗，我們建議使用帶有玻璃底部的蓋玻片 ibidi 載玻片，因為它們不透氣。

　　

　　

 

　　由于 µ-Slide 18 Well-Flat 的開孔結(jié)構(gòu)和使用的物質(zhì)量少，蒸發(fā)率高。 因此，玻片僅推薦用于不超過 48 小時的短期檢測。

　　

　　

 

　　不可以，因為 µ-Slide 2 Well Co-Culture 的小孔之間很有可能會發(fā)生交叉污染。 但是，可以在兩個主要孔中進行兩個獨立的實驗。

　　

　　

 

　　能， 隨著時間的推移，運動細胞可能會在 µ-Slide 2 孔共培養(yǎng)中的屏障上移動或增殖，尤其是當(dāng)它們以高融合度接種時。 為避免這種情況，在載玻片表面包被可能會有所幫助。

　　

　　

 

　　可以。 通過特殊設(shè)置，可以使用 ibidi 流體剪切力系統(tǒng)完全控制µ-Slide三合一通道培養(yǎng)載玻片。 以這種方式，可以使用層流將載玻片中的貼壁細胞暴露于交替梯度。 如需了解更多信息請聯(lián)系我們獲得技術(shù)支持。

　　

　　

　　根據(jù)孵化條件，少量培養(yǎng)基會迅速蒸發(fā)，尤其是在長期實驗期間。 此外，所有細胞培養(yǎng)箱都需要很長時間才能恢復(fù)濕度，尤其是在打開門之后。 雖然溫度和二氧化碳在幾分鐘內(nèi)恢復(fù)，但完全恢復(fù)濕度可能需要幾個小時。

　　

　　由于這些問題，我們建議使用以下技術(shù)之一來最大程度地減少蒸發(fā)：

　　

　　?將細胞培養(yǎng)容器放入裝有濕紙巾的培養(yǎng)皿中。

　　

　　?用封口膜密封培養(yǎng)容器。

　　

　　?使用 ibidi 防蒸發(fā)油（例如硅油）。

　　

　　詳細的應(yīng)用說明可參見細胞共培養(yǎng)的全新實驗方案

　　

 

　　

　　ibidi 聚合物蓋玻片對機械刮擦很敏感。 如果在將 ibidi µ-Slide/µ-Dish 直接放在工作臺上或培養(yǎng)箱內(nèi)時不加倍小心，它可能會受到損害。 因此，在顯微鏡下可能會看到小劃痕。 為避免這種影響，我們建議使用µ-Slide Rack或µ-Dish Rack等保護底部材料。 該解決方案還允許同時方便地處理多達8個µ-Slide或6個µ-Dish。

　　

　　10、如何最小化µ-Plate 24 孔中的彎液面？

　　

 

　　彎液面的形成是小型開放孔的固有特性，無法完全避免。

　　

　　與疏水表面相比，彎液面更容易在親水表面上形成。由于大多數(shù)貼壁細胞類型不能很好地附著在疏水表面上，ibidi 提供具有親水、組織培養(yǎng)處理表面和最佳細胞粘附特性的培養(yǎng)容器 ( µ-Plate 24 孔黑色 ID 14 mm ibiTreat，#82426）。然而，在這種情況下，彎液面的形成可能比使用未涂層板時更突出。

　　

　　為了減少彎液面的形成，請嘗試使用具有未經(jīng)處理的疏水表面的 µ-Plate 24 Well Black ID 14 mm Uncoated, Hydrophobic (#82421)。當(dāng)充滿水時，該表面幾乎不會形成彎液面。然而，細胞培養(yǎng)基中的蛋白質(zhì)會附著在孔的表面。一段時間后，這將形成非共價單分子涂層，形成親水表面和突出的彎月面。水和緩沖液都不能洗掉蛋白質(zhì)涂層。

　　

　　為了盡量減少成像過程中的半月板問題并確保細胞附著，您可以在 µ-Plate 24 Well Black ID 14 mm Uncoated, Hydrophobic 中嘗試以下方案：

　　

　　? 用結(jié)合蛋白（例如聚-L-賴氨酸或纖連蛋白）包被孔以支持細胞附著。使用盡可能小的體積以確保只有孔的下部是親水的（例如，0.5–0.8 ml）。小心處理板，使孔的上部不與蛋白質(zhì)溶液接觸。涂敷后，小心地除去溶液。

　　

　　? 將細胞接種到 0.5–0.8 ml 培養(yǎng)基中。定期檢查，至少每天一次，看看這個量是否足以確保您的細胞存活。如有必要，更換培養(yǎng)基，不要讓孔的上部“濕”。

　　

　　? 成像時，用 1.5–2 ml 無蛋白質(zhì)溶液或緩沖液替換培養(yǎng)基?，F(xiàn)在，第一步的親水涂層應(yīng)該低于您的填充水平，并且由于孔上部的疏水性，應(yīng)該只會形成最小的彎液面。