date:2021-12-22 13:04:13
細胞劃痕實驗（Wound Healing)是一種操作簡單，經濟實惠的研究細胞遷移/腫瘤侵襲的體外試驗方法。為了研究細胞遷移的機制，科學家們傳統上轉向“劃痕試驗”，它利用移液器尖端在多孔板中的單層細胞上“劃痕”，并觀察間隙所需閉合的時間（這些有時也被稱為“傷口閉合”或“傷口愈合”分析）。這種類型的實驗允許分析細胞遷移，并可以用各種藥物和化學品來增強，以闡明特定的機制。
在 ibidi 35mm µ-Dish 中培養的內皮細胞，預置2-Well Culture-Insert。移除插件后，讓細胞遷移 24 小時，然后固定在 4% PFA 中，并進行透化。VE-鈣粘蛋白（洋紅色）、 F-肌動蛋白用鬼筆環肽（綠色）和細胞核用DAPI（藍色）的抗體染色，然后進行共聚焦成像。
Derek Sung, University of Pennsylvania School of Medicine：
我一直都有進行劃痕分析。與大多數體外測定類似，一致性是獲得準確和可重復結果的關鍵。作為進行過無數次此實驗的人，使用移液器手動創建間隙存在一些過去給我帶來麻煩的關鍵問題。這就是為什么發現 ibidi Culture-Inserts是一種救星。ibidi 細胞培養插件與傳統的劃痕檢測方法相比具有許多優勢：
1. 標準的間隙距離
傳統劃痕分析和使用移液管手動劃痕大挑戰之一是間隙距離不一致。而且，劃痕往往劃不直。因此，起始距離通常會在幾十到幾百微米之間變化。ibidi 的細胞培養插件中心會產生500 µm 無細胞的人造間隙。這確保了間隙是直的，并且每次的距離都是一致的。
2. 干凈的遷移邊緣
手動劃痕還會產生未完全去除的自由浮動細胞的問題。這些自由漂浮的細胞可以通過延遲自由邊緣的遷移、釋放細胞內內容物或重新附著來影響遷移率。ibidi 的細胞培養插件是可移除的，留下干凈筆直的邊緣。
3. zuei小化細胞數
傳統的劃痕檢測是在多孔板中完成的，需要一層匯合的細胞。如果實驗有多種條件（藥物治療或基因操作）并且需要多次重復，這會需要增加大量細胞。對于珍貴或昂貴的細胞（例如從難以獲得的組織中分離出的原代細胞），這些實驗可能變得難以進行。ibidi 的細胞培養插件具有較小的生長面積，可大限度地減少實驗所需的細胞數量（準確地說，每孔0.22 cm 2）。這允許大限度地利用寶貴的細胞或增加重復次數。
4. 蓋玻片底皿
劃痕分析通常在多孔板中進行，底部厚，聚苯乙烯，只允許明場成像和間隙距離的量化。ibidi 的細胞培養插件具有經過組織培養處理和滅菌的蓋玻片底部。這允許進行明場和免疫熒光成像。就我個人而言，我認為這是該產品好的方面，讓我們能夠看到如細胞骨架、細胞粘附形態、核形態等結構。此外，多模態成像功能大限度地提高了單個實驗的數據量，從而節省了成本和試劑。
5. 單個實驗的獨立插件
“邊緣效應”是指一種細胞培養現象，其中多孔板外周的孔比內孔經歷更多的蒸發，導致不同的條件和潛在的不一致結果。使用多孔板進行劃痕檢測時可以看到類似的效果，影響結果的一致性和重現性。ibidi 的細胞培養插件單獨包裝，用于單次實驗。這可以防止任何“邊緣效應”并確保數據一致。另外，培養皿設計有蓋子鎖定功能，以確保在處理盤子時蓋子保持打開狀態。
與槍頭劃痕檢測相比，ibidi 傷口愈合插件可提供更高的重現性
由于細胞遷移開放區域隨時間發生變化。使用 ibidi Culture-Insert 2 孔（左）和用移液器吸頭刮擦產生間隙的對比。數據來源：德國弗萊堡大學的 M. Börries。
傷口愈合插件
VS
槍頭劃痕
乍一看，槍刮和放置插件的方法似乎是兩種非常相似的創建無細胞間隙的方法。 然而，仔細觀察，這兩種方法可能在重要檢測結果方面的影響有所不同：
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