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ibidi：細(xì)胞培養(yǎng)、免疫熒光等細(xì)胞實驗好幫手

1.一體化小室——細(xì)胞培養(yǎng)&顯微成像兩用玻片/皿 

細(xì)胞免疫熒光實驗?zāi)闶窃趺醋龅模?br />
還在用小玻片，先泡酸、再晾干、再 coating、再種細(xì)胞、染色、封片成像？

那您太 out 了吧！

使用 ibidi 產(chǎn)品，先養(yǎng)細(xì)胞、然后直接固定、染色、成像，在培養(yǎng)皿/玻片上全部搞定！能幫您把細(xì)胞養(yǎng)好、又幫您省時省力的獲得漂亮的成像結(jié)果（見圖 1）！

 

圖 1. 傳統(tǒng)爬片方法與 ibidi 產(chǎn)品免疫熒光實驗比較

2.ibidi 產(chǎn)品底部媲美蓋玻片厚度，為高分辨率顯微成像而設(shè)計的光學(xué)特性 

德國 ibidi 公司創(chuàng)新的μ-Slide 與μ-Dish 系列產(chǎn)品，與一般市面上常見的細(xì)胞培養(yǎng)皿不同，其底部是由獨(dú)特的塑料制成，具有與玻璃材質(zhì)媲美的高光學(xué)穿透與低背景熒光等特性。相較于一般細(xì)胞培養(yǎng)產(chǎn)品（圖 2 左），ibidi 產(chǎn)品（圖 2 右）底部構(gòu)造厚度符合 No.1.5 標(biāo)準(zhǔn)蓋玻片厚度（180 μm），用高倍鏡物鏡觀察，可以使焦距集中在待測樣本上，產(chǎn)生良好的成像結(jié)果。



圖 2. ibidi 細(xì)胞培養(yǎng)產(chǎn)品底部媲美蓋玻片厚度

3.ibidi 產(chǎn)品底部化學(xué)耐受性強(qiáng)，適用于多種常用的細(xì)胞固定劑（見圖 3）圖 3.ibidi 產(chǎn)品底部適用的溶劑列表 



4.多種多樣的細(xì)胞培養(yǎng)表面 

細(xì)胞進(jìn)行生長、發(fā)育和信號傳遞很大程度上取決于細(xì)胞容器的表面處理方式。ibidi 產(chǎn)品底部相比于普通培養(yǎng)皿更加平滑（見圖 4）。目前，ibidi 產(chǎn)品μ-Slides 和μ-Dishes 有標(biāo)準(zhǔn)底、玻璃底以及多種底部預(yù)包被的產(chǎn)品，適用于培養(yǎng)不同的細(xì)胞類型，不同底之間的比較見圖 5。

ibidi 標(biāo)準(zhǔn)底具有親水超薄的特性，該底部的光學(xué)特性符合多種成像技術(shù)的要求，如相差、共聚焦和雙光子顯微成像。

ibiTreat，作為 ibidi 受歡迎的表面處理方式，通過了大量不同細(xì)胞系和原代細(xì)胞培養(yǎng)測試，且已發(fā)表的 2000 多篇使用了 ibidi 產(chǎn)品的期刊論文中，超過 90% 使用了 ibiTreat，表明大多數(shù)細(xì)胞在 ibiTreat 下生長良好，無需進(jìn)行額外的表面處理。ibiTreat 是一種物理修飾的表面處理方式，讓耗材表面親水，利于絕大多數(shù)種類的細(xì)胞貼壁，可與其他標(biāo)準(zhǔn)細(xì)胞培養(yǎng)瓶和培養(yǎng)皿相媲美。

圖 4. AFM（原子力顯微技術(shù)）測量表面粗糙度。ibidi 產(chǎn)品（右下）比普通培養(yǎng)皿具有更平滑的底部構(gòu)造，更加的成像效果。

ibidi 標(biāo)準(zhǔn)底也有疏水、無包被的表面可以選擇。可以根據(jù)具體的實驗需求，進(jìn)行特定的包被，或者直接用來培養(yǎng)非貼壁細(xì)胞。

Ibidi 也有玻璃底的產(chǎn)品。玻璃底可以直接培養(yǎng)細(xì)胞，但可能需要進(jìn)行表面處理來促進(jìn)細(xì)胞更好的貼壁。ibidi 研發(fā)的玻璃底產(chǎn)品尤其適用于 TIRF、單光子及單分子應(yīng)用。

圖 5. ibidi 標(biāo)準(zhǔn)底與 ibidi 玻璃底 

基于以上特殊的底部構(gòu)造，ibidi μ-Dish，μ-Slide 以及μ-plate 等產(chǎn)品都既適用于常規(guī)細(xì)胞培養(yǎng)，又可以簡化免疫熒光實驗步驟、節(jié)約實驗時間，并且獲得理想的顯微成像效果。

ibidi μ-Dishes

ibidi μ-Dishes 產(chǎn)品可以進(jìn)行常規(guī)的細(xì)胞培養(yǎng)、轉(zhuǎn)染、免疫熒光實驗以及高分辨率顯微成像。目前 ibidi μ-Dishes 主要包括 35 mm（高壁和低壁）以及 50 mm 兩種（見圖 6）。50 mm 更適合于培養(yǎng)大量細(xì)胞，如需要收集細(xì)胞做生化實驗等。35 mm 低壁的產(chǎn)品更適合于在顯微鏡下對細(xì)胞進(jìn)行操作，如進(jìn)行電生理膜片鉗記錄細(xì)胞，或者吸取單細(xì)胞進(jìn)行單細(xì)胞基因組測序等實驗。

圖 6. ibidi μ-Dish 系列產(chǎn)品：35 mm（high wall 和 low wall），50 mm（low wall）。

ibidi μ-Dishes 另外一個精巧的設(shè)計是帶鎖的蓋子（見圖 7）。當(dāng)蓋子處于 lock 位置，較大程度減小蒸發(fā)的影響，因而可以在非濕潤環(huán)境中進(jìn)行長時程的細(xì)胞實驗，如需要在培養(yǎng)箱外，顯微鏡下進(jìn)行長時程的活細(xì)胞觀察實驗。由于 Dish 特殊的氣體通透特性，在細(xì)胞培養(yǎng)期間氣體交換（C02，O2）是并不受 lock 位置影響的。

圖 7. 帶鎖的培養(yǎng)皿設(shè)計

μ-Slides well 系列產(chǎn)品：μ-Slides 2 well，4 well，8well如果您希望同時獲得多個樣品的顯微成像結(jié)果，如比較同種細(xì)胞加入不同藥物刺激的形態(tài)變化，或者實驗初期用來篩選好用的抗體及摸索理想抗體濃度等實驗，推薦使用μ-Slides well 系列產(chǎn)品（見圖 8）。不同大小的開放小室適用于不同量的細(xì)胞培養(yǎng)。其底部也是 ibidi 標(biāo)準(zhǔn)底處理，滿足細(xì)胞培養(yǎng)、免疫熒光實驗、高分辨率顯微成像的需求。

圖 8. μ-Slides well 系列產(chǎn)品：μ-Slides 2 well，4 well，8well在此基礎(chǔ)上，如果需要進(jìn)行更佳的相差或者高的顯微鏡成像實驗，如進(jìn)行實時的活細(xì)胞不同位點(diǎn)的掃描，μ-Slides well ph+系列產(chǎn)品更適合您。在傳統(tǒng)的μ-Slides well 的孔的中間，ph+產(chǎn)品加了一層特殊的平板（見圖 9），這層平板可以有效避免開放小室中影響相差成像效果的凹液面的形成。在這層平板與 well 的四周有縫隙，方便向其中加入細(xì)胞及換液等操作。

圖 9. μ-Slides well 與 μ-Slides well ph+ 產(chǎn)品以及成像對比圖。A，產(chǎn)品對比圖，ph+在中間有特殊的平板，四周有孔洞，方便鋪細(xì)胞及換液等操作。B，ph+有效防止凹液面形成（右側(cè)），整個視野都有良好的相差成像效果。

帶網(wǎng)格（Grid）的 Dish、well 產(chǎn)品

以上產(chǎn)品還有底部帶網(wǎng)格的（見圖 10），如 35 mm Dish Grid-500，μ-Slides 8 well Grid-500?？蓱?yīng)用于細(xì)胞及細(xì)胞團(tuán)的重定位，特定區(qū)域發(fā)生事件的數(shù)目如細(xì)胞轉(zhuǎn)染效率的統(tǒng)計，細(xì)胞運(yùn)動距離的參考，對單個細(xì)胞進(jìn)行顯微注射或者追蹤軸突的生長等。同樣這些產(chǎn)品具備 ibidi 標(biāo)準(zhǔn)底設(shè)計，適用于高分辨率的顯微成像。

圖 10. 帶網(wǎng)格產(chǎn)品的底部網(wǎng)格圖示

μ-Slide channel 系列產(chǎn)品

一體化小室產(chǎn)品還包括μ-Slide channel 系列產(chǎn)品（圖 11A），這類產(chǎn)品有通道式的細(xì)胞培養(yǎng)空間，同樣具有 ibidi 標(biāo)準(zhǔn)底，適合于高分辨率顯微成像。產(chǎn)品兩端有魯爾接頭，可應(yīng)用于流體剪切力實驗，即在培養(yǎng)基流動狀態(tài)下就行細(xì)胞培養(yǎng)。在開放小室中鋪細(xì)胞時，通常依賴于人為晃動操作，對于新手尤其容易使細(xì)胞聚團(tuán)，導(dǎo)致細(xì)胞分布不均（圖 11C）。而通道式的設(shè)計，巧妙回避這一問題，只需要向通道中加入細(xì)胞懸液，無需晃動（圖 11B），輕松使細(xì)胞在通道中均勻分布（圖 11D）。另外當(dāng)需要進(jìn)行準(zhǔn)確的少量試劑換液時，或者試劑、抗體珍貴，μ-Slide channel 系列產(chǎn)品將是理想選擇。

圖 11. μ-Slide channel 系列產(chǎn)品。A，μ-Slide I 及μ-Slide IV 產(chǎn)品圖示。B，μ-Slide I 為例說明系列產(chǎn)品適用步驟，向通道中加入 100 ul 細(xì)胞懸液，向一側(cè)儲液池中加入無細(xì)胞的培養(yǎng)液，向另一側(cè)儲液池中加入無細(xì)胞的培養(yǎng)液，置于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。C，開放小室的細(xì)胞分布，依賴于晃動操作，經(jīng)常會分布不均勻。D，channel 中細(xì)胞的分布，由于其獨(dú)特的集合設(shè)計，使細(xì)胞非常容易的均勻分布在通道中。

Removable & Sticky 系列產(chǎn)品

考慮到有些用戶希望保存標(biāo)本，ibidi 公司還開發(fā)了 removable 的硅膠培養(yǎng)室（圖 12A），用于細(xì)胞培養(yǎng)和顯微成像。將硅膠材料移除后，可以封片進(jìn)行保存。

另外，ibidi 公司還開發(fā)了 Sticky 的 well 及通道（圖 12B-D）。這類產(chǎn)品通用性強(qiáng)，可與多種多樣的底部材料粘貼。而且對于不易放入通道培養(yǎng)的細(xì)胞、組織等，可以選擇先放在底部材料上，再將培養(yǎng)通道粘貼到其上進(jìn)行實驗。

圖 12. Removable & Sticky 系列產(chǎn)品。A，12 well Chamber, removable。B，sticky-Slide I Luer。C，sticky-Slide 8 well。D，sticky-Slide VI 0.4。
 

易必迪 ibidi 公司專注于細(xì)胞培養(yǎng)及功能實驗的耗材及儀器開發(fā)，產(chǎn)品設(shè)計巧妙，適用于各種各樣的實驗需求，簡化實驗步驟，節(jié)約實驗時間。如果您也在培養(yǎng)細(xì)胞，也在做細(xì)胞免疫熒光實驗，也在做細(xì)胞功能實驗，那么快來試試 ibidi 系列產(chǎn)品吧，讓您實驗變得輕松簡單，事半功倍！